Кал на лямблии

Что такое лямблии

Возбудитель заболевания хорошо известен и изучен. В человеческом организме лямблии существуют в двух формах:

• вегетативной (трофозоиты);
• цистной.

Трофозоиты (вегетативные формы лямблий) паразитируют в тонком кишечнике, но мигрируя в толстую кишку превращаются в цисты(споры), которые вместе с каловыми массами, выходят во внешнюю среду. Лямблии в виде цист могут долгое время сохранять свои жизненные силы в ожидании благоприятных условий. Попав в кишечник человека, цисты превращаются в трофозоиты, прикрепляясь к слизистой оболочке кишечника и питаясь таким способом. Жизненный цикл трофозоитов 40 дней, но само заболевание может протекать очень длительно, а иногда принимать и хроническую форму, поскольку постоянно происходит реинвазия(самозаражение) лямблиями. Вследствие постоянного существования этих простейших в организме развивается синдром хронической эндогенной интоксикации. В сочетании со снижением функций иммунной системы это может привести к нарушениям в работе всех органов и систем организма.

Заражение происходит фекально оральным путем только от инфицированного лямблиями человека. Лямблии, паразитирующие в грызунах, не являются опасными для человека.

Формы паразитов

Лямблии живут в организме человека в двух формах, которые сменяют одна другую:

1. Подвижная (вегетативная) активно паразитирует, питается и размножается за счет питательных веществ хозяина.
2. Неподвижная (цисты) неактивная форма, которая выделяется с калом и долго сохраняется в окружающей среде.

Диагностика заболевания направлена на обнаружение активных и неактивных форм лямблий в кале, дуоденальном содержимом, биоптате тонкого кишечника. Также исследуют сыворотку крови на предмет антител к структурным компонентам паразита.

Исследование дуоденального содержимого

Микроскопическое исследование дуоденального содержимого — высокоинформативный, но инвазивный способ обнаружения лямблий, поэтому применяется реже.

Пока трофозоиты не ослабили подвижность и не подверглись разрушению желчью, проводится анализ всех порций дуоденального содержимого. Иногда микроскопия желчи фиксирует вегетативные формы лямблий в каждой из порций.

Рисунок 2 — Трофозоиты лямблий (G. lamblia) под 100-кратным увеличением, окрашенные по Романовскому-Гимзе (А) и меченые антителами (непрямая РИФ, В). Источник — Eva Nohýnková, Department of Tropical Medicine

Раньше ставился диагноз «лямблиозный холецистохолангит», если в желчи обнаруживались лямблии. Однако исследованиями установлено деструктивное влияние нормальной желчи на жизнедеятельность G. lamblia, а выявление возбудителей в пузырной желчи в большей степени связаны со смывом паразитов со стенок кишки гипертоническим раствором с глюкозой или сернокислой магнезией. Для маленьких детей данный метод малоприменим, хотя эффективность иногда доходит до 70%.

Содержимое просвета двенадцатиперстной кишки включает в себя желчь, пищеварительные ферменты, примеси желудочного сока и т.д. Выявление G. lamblia происходит при микроскопии субстрата, полученного специальным зондом, введенным в двенадцатиперстную кишку. Обычно определяются вегетативные формы, реже цисты.

Эффективность исследования основана на визуальном анализе постоянно находящихся в организме лямблий, в отличие от фекалий, в которых лямблии, зачастую, труднообнаруживаемы с первого взгляда. Однако, выявление лямблий в труднодоступных отделах тонкой кишки, вне зоны действия оливы зонда, является невозможным.

Показания к исследованию крови на лямблии

Анализ на лямблиоз выявляет наличие паразитов в организме. Это может быть микроскопическое исследование кала, но цисты (споровая форма, которую приобретают микроорганизмы, когда оказываются в прямой кишке) выявляются не всегда, а лишь в 50-70%.

Симптомы не специфичны, поэтому, чтобы назначить адекватное лечение, врачу необходимо доподлинно знать, чем вызваны проблемы с пищеварением.

Поэтому обычно вкупе с анализом кала назначается серологическое исследование крови на антитела. Доктор назначит этот анализ в том случае, если у него есть подозрения на заболевание.

Клинические проявления заболевания следующие:

• продолжительная по времени диарея,
• боли в животе,
• повышение температуры тела и озноб,
• высыпания на коже, рвота.

Метод проведения исследования

Микроскопия крови для обнаружения возбудителя проводится методом ИФА (иммуноферментного анализа) крови. Цель исследования – установить возбудителя и оценить ответную реакцию организма. В ходе лабораторной экспертизы определяется наличие в крови антител, иначе иммуноглобулинов (Ig), к специфическим антигенам (чужеродным организмам).

Антитела (АТ) – это белковые соединения иммунной системы, в задачу которых входит распознавание и последующее уничтожение антигенов. Их активная выработка свидетельствует о присутствии чужеродного агента. В случае диагностики лямблиоза антигеном являются лямблии.

ИФА производиться поэтапно. Изначально антиген помещается на исследовательскую поверхность, и к нему добавляется сыворотка крови. Если антиген не признается антителами иммунной системы, как «родной», они пытаются его уничтожить. Таким образом, происходит формирование иммунного комплекса «антиген-антитело».

Далее к комплексу подсаживаются специальные реагенты (в случае определения лямблий их обычно девять). Оценка результата проводится по степени окрашивания с помощью прибора колориметра ИФА (анализатора). Интенсивность окраски соответствует концентрации антител (чем она выше, тем большее количество лямблий присутствует в организме).

Такое исследование позволяет выявить основные иммуноглобулины IgA; IgM; IgG. Декодирование результатов проводится в лаборатории. Иммуноферментный анализ крови на лямблиоз назначается спустя две недели, после проведенной ранее микроскопии кала, в том случае, если паразиты не были обнаружены, но самочувствие больного не улучшается.

Сроки проведения ИФА обусловлены тем, что выработка иммуноглобулинов к чужеродным агентам происходит через определенный промежуток времени после их внедрения в организм. Для точной постановки диагноза возникает необходимость выявить истинного возбудителя, установить форму и стадию заболевания. В качестве альтернативы ИФА пациенту может быть назначен анализ полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Иммуноферментное исследование крови

Данный анализ крови на антитела к лямблиям с большой долей вероятности позволяет выявить наличие данного паразита в организме человека. Точность диагностики достигает 97 %. В результате выявляют наличие антител к антигенам паразита. Забор крови на лямблии проводят внутривенно.

Как сдавать анализ крови на лямблии

Правильная подготовка к сдаче анализа крови на антитела к лямблиям позволит своевременно выявить возбудителя и приступить к лечению.

Сдавать кровь нужно натощак. Нельзя принимать пищу позже, чем за 9-11 часов до проведения процедуры забора биоматериала. Для более точной диагностики следует отказаться от курения и приема спиртных напитков.

За три дня до проведения процедуры по забору крови на диагностику следует прекратить прием антибиотиков, в противном случае картина может быть искажена.

Для верной постановки диагноза забор крови проводят не однократно, а на протяжении недели. В результате такого подхода можно проследить динамику развития недуга.

Расшифровка анализов крови

При попадании в организм паразитов, начинается активная выработка антител к возбудителю. Данный метод отличается тем, что выявляет наличие этих самых антител. По их типу и количеству можно с достоверностью определить, на какой стадии – начальной, острой или хронической – находится заболевание.

Если в организме наблюдается повышение антител IgM, это говорит о том, что заражение произошло не позже двух недель назад. Лямблиоз находится в начальной стадии заболевания.

После того, как начальная стадия завершилась, происходит активная выработка иммуноглобулинов IgG. Их содержание в крови пациента – явный признак того, что недуг перешел в острую степень течения.

При переходе заболевания хроническую стадию уровень IgG значительно «подскакивает».

Как только заболевание идет на спад, уровень антител начинает снижаться. Следует учитывать тот факт, что данное снижение происходит не слишком быстро. На протяжении двух месяцев, а то и дольше, после гибели всех паразитов, анализ может показывать положительный результат. Это связано с тем, что в организме все еще находятся следы жизнедеятельности лямблий, дающих токсический эффект. Выводиться токсины и яды могут до полугода, поэтому, чтобы получить развернутую картину состояния организма, следует проводить комплексное исследование.

Недостатки

Иммуноферментное исследование крови имеет свои недочеты. Так, данный анализ не позволяет определить, когда именно произошло заражение. Это связано с тем, что антитела начинают вырабатываться не сразу после заражения.

Диагностика лямблиоза

Точный диагноз устанавливается на основании:

• клинических проявлений патологии;
• лабораторных исследований – анализа крови и кала у детей на лямблии.

Наиболее информативным при такой патологии у ребенка является анализ кала на лямблии. Именно в фекалиях сосредоточено наибольшее количество паразитов, при этом анализ крови на лямблии у детей может оказаться неинформативным.

Также специалисты рекомендуют сдать для диагностики дуоденальное содержимое – смесь желчи, желудочного сока и секрета поджелудочной железы. Когда заболевание переходит в хроническую стадию, наблюдается снижение секреции желудка.

Дополнительно специалист может назначить ультразвуковое исследование желчного пузыря с целью выявления тонуса внутреннего органа.

Как сдавать кровь на лямблии

Для подтверждения диагноза понадобится незначительное количество венозной крови. Иммуноферментный анализ крови (ИФА) позволяет выявить антитела, указывающие на присутствие паразитов. Сдавать кровь необходимо, предварительно подготовив ребенка:

• последний прием пищи за десять часов до сдачи крови из вены на лямблии;
• из рациона ребенка нужно исключить чай и сок;
• непосредственно перед процедурой нужно выпить достаточное количество воды.

Перед процедурой сдачи крови нужно дать ребенку выпить достаточное количество воды.

Расшифровка результатов проводится специалистом, в первую очередь, врач обращает внимание на два вида антител

• IgM – количество антител резко увеличивается с момента инфицирования, максимальное значение фиксируется к концу второй недели, затем на протяжении нескольких месяцев их количество уменьшается. Увеличение антител IgM указывает на острую фазу заболевания.
• IgG – обнаруживаются в крови спустя несколько недель после начала болезни, уровень антител повышается и снижается медленно. В некоторых случаях они могут оставаться в организме ребенка всю жизнь. Это указывает на то, что к заболеванию выработался определенный иммунитет. После соответствующего лечения количество антител снижается, этот процесс длится до полугода.

Расшифровка результатов на антитела следующая:

• ОПд больше 1 – лямблиоз у ребенка подтверждается;
• ОПд от 0,85 до 1 – лямблиоз под вопросом, специалист рекомендуют сдать анализ повторно;
• ОПд меньше 0,85 – лямблиоз исключается.

Стандартные значения классов антител при ИФА анализе крови

Примечание: исследование крови у детей на лямблии считается более точным, но цена анализа гораздо выше стоимости копрограммы (анализа кала).

Анализ кала на лямблии

Исследование кала у малышей на лямблии – наиболее достоверный метод диагностики. Такое обследование ребенка дает возможность обнаружить не только паразитов, но также и яйца. Анализ кала на лямблии нужно сдавать не менее четырех раз с перерывом в два дня – это связано с особенностями жизненного цикла паразитов.

При обследовании детей на лямблиоз специалисты часто сталкиваются с ложноотрицательными результатами. Связано это с рядом факторов:

• несоблюдение технологии сбора биологического материала;
• сбор биологического материала одновременно с приемом медикаментов, воздействующих на паразитов;
• несвоевременная доставка биологического материала в лабораторию;
• некачественная диагностика или неточная расшифровка результатов;
• анализ на лямблии проводится в период, когда выделение паразитов временно прекращается, в некоторых случаях врач рекомендует сдать анализ не менее шести раз.

Устранить погрешности при исследовании кала на возбудителя лямблии у детей можно, исключив прием всех медикаментов.

Устранить погрешности при исследовании кала на возбудителя лямблии у детей можно следующим образом:

• сдать биологический материал необходимо не менее четырех раз, при необходимости врач назначит дополнительное исследование;
• для диагностики используются жидкие фракции биологического материала;
• за неделю до предполагаемой даты исследования нужно исключить прием всех медикаментов;
• прежде чем сдать биологический материал, необходимо взять в лаборатории специальные консерванты, которые увеличивают срок его хранения до исследования.

Лямблиоз

Лямблиоз широко распространённое заболевание, вызываемое представителем семейства Protozoe Lamblia intestinalis (Giardia Lamblia).

Источником инфекции является человек, инфицированный лямблиями. Передача инфекции осуществляется фекально-оральным путём. Основным фактором передачи является вода, но перенос может осуществляться и через пищевые продукты, на которых цисты лямблий сохраняют жизнеспособность от 6 часов до 2 суток, возможна и контактная передача от человека к человеку. Лямблии способны вызывать серьёзные кишечные заболевания людей, как в форме эпидемий, так и в виде спорадических случаев. Дети более подвержены инвазии лямблиями, заболевание у них протекает с более выраженными клиническими признаками. Инфекция лямблиями может спонтанно исчезнуть через 6 недель, а может персистировать годами. Колонизируя слизистую тонкой кишки, трофозоиты лямблий проникают внутрь эпителия, и вызывают системный иммунный ответ.

Хотя лямблиоз известен уже на протяжении длительного времени, существуют серьезные проблемы в его диагностике. Традиционно она проводится по обнаружению цист или трофозоитов лямблий в образцах фекалий или дуоденальном содержимом.

Эффективность данных методов составляет около 50% из-за характерной прерывистости в цистовыделении, связанной с особенностями размножения трофозоитов лямблий. Выявление антител к антигенам лямблий существенно дополняет методы, направленные на выявление лямблий в фекалиях хотя и этот тест также не всегда является достаточно чувствительным. Тест целесообразно проводить через 1-2 недели от появления клинической симптоматики, если исследования кала в более ранний период не дали результата.

По данным клинических исследований, антитела к антигенам лямблий выявляются у 39 — 42% больных с патологией желудочно-кишечного тракта. У 89 — 92% из них лямблиоз подтверждается положительным результатом тестирования образцов фекалий или дуоденального содержимого на наличие цист лямблий. Существует проблема перекрёстных реакций антигенов лямблий с другими паразитарными и соматическими антигенами, которые дают ложноположительные результаты, поэтому для повышения надёжности и достоверности диагностики лямблиоза необходимо комплексное обследование.

Методы диагностики: виды анализов на лямблии

Для обнаружения паразитов используют следующие диагностические методы:

• Анализ крови
• Анализ кала
• Дуоденальное зондирование (взятие желчи на анализ)
• Биопсия кишечника
• ПЦР-диагностика
• Иммуноферментное исследование крови

Анализ крови показывает наличие лямблиоза примерно через три недели после заражения. Этот метод исследования считается малоэффективным, поскольку некоторые антитела в крови могут обнаруживаться в течении полугода даже после полного выздоровления.

Он поможет определить цисты в организме человека на начальных этапах. Для этого может использоваться микроскоп. Однако при этом виде диагностики не всегда определяется разновидность паразитов, кроме того в материале также могут отсутствовать лямблии. Существуют также и другие новейшие методы исследования кала, которые созданы на основе защитно-ферментного анализа. На протяжении пятнадцати минут после сдачи можно определить лямблии. До трех часов обнаруживаются цисты.

Для ПЦР-диагностики используются тест-системы. Такое исследование имеет некотрые преимущества: более точно определяет лямблии, делается в короткие сроки. В основе анализа – установление ДНК патогенных организмов. Для этого берут желчь, слюну, кров или кал.

Исследование крови

Диагностика лямблиоза с помощью анализа крови

Анализ крови на выявление данных паразитов делают ранним утром. Ее берут из вены. Чтобы результаты были более точными, необходимо придерживаться следующих рекомендаций перед процедурой:

1. Исключить употребление алкоголесодержащих напитков.
2. Не курить перед проверкой.
3. Ограничить физические нагрузки.
4. Если пациент применяет какие-то медикаменты, то врач должен быть поставлен в известность.
5. Кровь необходимо сдавать на голодный желудок. Перед анализом не рекомендуется принимать пищу за десять часов.
6. За несколько дней до диагностики ограничить употребление острой, жирной и жареной пищи.
7. Можно пить воду, но нельзя другие напитки.
8. Также не сдают кровь после физиотерапевтических процедур, рентгена и ректального обследования.

Если требования к подготовке к сдаче крови нарушены, об этом следует сообщить специалисту, потому что исследование желательно перенести. Кров берут для исследования из вены в небольшом количестве.

Исследование кала

Анализ кала – самый эффективный метод диагностики лямблиоза

Данный метод заключается во взятии анализа на протяжении трех суток. Через десять дней процедуру необходимо повторить.

Основными правилами относительно подготовки к анализу являются:

1. Не рекомендуется применение противопаразитарных препаратов до семи дней.
2. Если испражнения высокой плотности рекомендуется употребление препаратов со слабительным эффектом, например, Сульфат магния или Дуфалак. Достоверность результата обеспечивается, если материал для исследования жидкого вида.
3. Если подозревается у больного острая стадия болезни, то делать анализ необходимо не позднее двадцати минут после сдачи материала.

Когда в кале присутствуют участки с измененным видом, то берутся именно они. Сдавать необходимо кал из последней порции. Материал должен быть доставлен в лабораторию как можно быстрее. Кал, взятый более одного дня, уже не является пригодным для анализа.

Больше информации об анализах на лямблии можно узнать из видео:

Кал берут в специально предназначенную для этого ложку, которая прилагается к контейнеру. При этом требуется небольшое его количество из разных участков. После этого ложечку помещают в контейнер, комплектуемый консервантом. Объем материала для исследования должен занимать не более тридцати процентов емкости посуды. А температура его хранения и транспортировки не должна быть выше восьми градусов.

При ПЦР-методе в материал добавляется специальный фермент, обеспечивающий синтез копии ДНК паразитов. После этого определяют наличие определенного организма.

Что такое лямблии

Лямблии – это не глисты, а микроскопические паразиты класса простейших. Место паразитирования лямблий — верхние отделы тонкой кишки. К слизистой оболочке лямблия прикрепляется передней частью тела, а задний конец свободный.

На одном месте трофозоиты остаются фиксированными непродолжительное время. Они часто открепляются от ворсинок и снова прикрепляются к ним, но уже в другом месте или переходят в свободное состояние. При интенсивной инвазии могут проникать в ткани ворсинок.

Периодически открепляющиеся от слизистой оболочки трофозоиты инцистируются или дегенерируют. Экспериментальными исследованиями на собаках установлено, что через 10-15 дней после заражения основная масса трофозоитов локализуется в тощей кишке и изредка в двенадцатиперстной.

Анализ на лямблиоз. Лямблии относятся к наиболее распространенным паразитам человека, обитающим в верхних отделах тонких кишок. Современные данные о морфологических и биологических особенностях лямблий свидетельствуют об их исключительной приспособленности к обитанию именно в этом участке желудочно-кишечного тракта.

В дальнейшем популяция лямблий перемещается из проксимальных в средние или в средние и дистальные отделы тонкой кишки. Образование цист (инцистирование) в первые 10-15 дней происходит в тощей кишке, редко — в двенадцатиперстной, а в более поздние сроки — в среднем и дистальном отделах тонкой кишки.

Это зависит от численности популяции лямблий, выраженности патологических сдвигов в месте паразитирования и давности инвазионного процесса. Цистовыделение при лямблиозе носит прерывистый характер.

Как проводится диагностика лямблиоза

Многообразие клинических проявлений лямблиоза и отсутствие симптомов, характерных только для этого заболевания, требуют обязательного лабораторного подтверждения диагноза. Материалом для исследований служат фекалии и дуоденальное содержимое. В дуоденальном содержимом обнаруживаются только трофозоиды, в оформленных фекалиях — только цисты, в жидких и полуоформленных испражнениях — трофозоиды и цисты.

В настоящее время с целью диагностики лямблиоза применяется ряд методик, которые различаются между собой чувствительностью, специфичностью и общедоступностью.

Самым доступным методом лабораторной диагностики лямблиоза является копрологическое исследование. При проведении исследований необходимо помнить, что цисты в кале можно обнаружить не всегда. Непостоянное выделение цист с калом требует неоднократного исследования фекалий, а также использование других методов лабораторного исследования.

Антитела к лямблиям. Больным с клиническими проявлениями лямблиоза, но при отрицательном результате исследования фекалий, целесообразно исследовать аспирант двенадцатиперстной или верхнего отдела тощей кишки. Как правило, в нём содержится большое количество лямблий, в том числе и трофозоидов (они видны в свежих мазках).

Анализ неудач в выявлении лямблий при исследовании фекалий позволил систематизировать основные причины ложноотрицательных результатов. К ним отнесены:

1. неправильно собранный материал для исследования;
2. представление в лабораторию кала на фоне приёма медикаментов, повреждающих морфологию паразитов;
3. погрешности лабораторного исследования;
4. исследование фекалий в так называемый «немой» период, когда прекращается выделение цист лямблий (8-14 дней).

Выявление лямблий возможно уже у 76% больных при устранении данных причин при первом обследовании кала. После второго исследования вероятность увеличивается до 90 %.

Самым надёжным методом диагностики лямблиоза является дуоденальная биопсия. Показаниями для проведения дуоденальной биопсии являются:

• типичная клиническая картина лямблиоза;
• отрицательный результат копрологических исследований;
• один из патологических симптомов (например, отёк и сегментация тощей кишки при эндоскопическом исследовании);
• патологический лактозотолерантный тест, (т.е. наличие не нормальной бактериальной флоры при аспирации содержимого кишечника);
• отсутствие секреторного Jgd;
• гипогаммаглобулинемия, (дефицит одного из видов белков в организме человека — гаммаглобулина);
• ахлоргидрия (отсутствие соляной кислоты в желудочном соке).

Иммунологические методы (метод ИФА выявления антигена Giardia lamblia) в последнее время широко используются во всем мире для диагностики лямблиоза. Подобные тест-системы обладают очень высокой чувствительностью и специфичностью, и позволяют одновременно выявлять как цисты, так и трофозоиды в образцах стула. Обычно G lamblia выявляется у 50-70% больных после единичного анализа стула. После трехкратного анализа – у 90% .

Выявление антител суммарных классов IgA, IgM, IgG к антигенам лямблий (серологические методы) является косвенным методом лабораторной диагностики лямблиоза. Может использоваться как дополнительный диагностический метод, позволяющий определить иммунный ответ организма на внедрение возбудителя.

Особенности сбора и исследования кала при лямблиозе

Протозоологические методы относятся к стандартным способам диагностики заболевания. Микроскопическое изучение материала проводится на окрашенных специальным раствором мазках из свежих фекалий человека. В большинстве случаев цисты паразита обнаруживаются при первичном исследовании кала. При получении отрицательного результата и сохранении симптомов через неделю сдается повторный анализ.

Жизненный цикл лямблий и особенности условий для выживания взрослых особей и цист требуют соблюдения правил сбора материала. Дело в том, что половозрелые патогены сохраняются в окружающей среде всего несколько часов. Их обнаружение указывает на острую форму заболевания. Цисты существуют в фекалиях гораздо дольше, поэтому исследование допустимо проводить в течение суток.

Точность подтверждения диагноза будет зависеть от ряда факторов, главным среди которых является правильное предоставление кала. Выделяют основные требования к материалу:

• стул должен быть собран в стерильную емкость специальным шпателем из разных участков;
• доставка в лабораторию осуществляется в течение 2–3 часов после сбора;
• в случае отсутствия возможности быстро довезти материал необходимо использовать особые консерванты;
• если ребенка или взрослого беспокоят запоры, то допустимо применение слабительного накануне сдачи анализа;
• объем исследуемого материала должен составлять 2–3 чайные ложки.

Поскольку обычно данные паразиты обитают в кишечнике, их следы будут заметны на результатах анализов кала, в нем обычно обнаруживают цисты лямблий.

При подозрении на лямблиоз у ребенка проводится комплексное обследование всех членов семьи. Поскольку цисты могут передаваться через бытовые предметы, заражение взрослых и других детей происходит достаточно быстро. При проведении исследования кала необходимо учитывать, что в первые три недели после инфицирования цисты не обнаруживаются

Именно поэтому повторные анализы важно сдавать даже при отрицательных результатах