Игх-исследование — это что такое?

Для чего используют иммуногистохимию при раке молочной железы

В области исследования грудной железы данное исследование используется в качестве предварительной диагностики для установления точного диагноза, в том числе при злокачественных образованиях. Данное исследование дает возможность определить следующее:

• Точное образование (доброкачественное или злокачественное) и назначение правильного лечения.
• Точное месторасположение (наличие метастаз в организме и их дислокацию).
• Первоначальный очаг заболевания.
• Стадию заболевания (например, степень рака).
• Пролиферацию клеток (распознать скорость размножения и развития раковых клеток).
• Ответ раковых клеток на медикаменты, их чувствительность, также можно отследить чувствительность к химиотерапии, к лучевой терапии.

Исследование способно детально изучить заболевание, что дает возможность полностью диагностировать заболевание и подобрать правильное лечение. Это играет не маловажную роль в диагностике, лечении, продолжительности жизни онкологических больных. Также можно сказать, что с помощью данного метода можно:

• на более раннем сроке диагностировать заболевание;

• выяснить непосредственный очаг заболевания;
• найти границы заболевания;
• определить точное место образования;
• определить точный вид новообразования;
• определить точную стадию развития;
• определить рост патологических клеток;
• узнать реакцию на препараты (в частности, на гормоны, на лучевую терапию и так далее);
• определить необходимость операции;
• помогает точно оценить качество лечения.

Применение технологии в репродуктивной медицине

Иммуногистохимия в репродуктивной медицине применяется для диагностики причин бесплодия и оценки потенциальной эффективности ЭКО. Известно, что беременность при применении вспомогательных репродуктивных технологий наступает у 35–45 % пациенток после первой попытки. Около 30 % пациенток имеют многократные неудачи, причины которых различны, в том числе неблагоприятное состояние эндометрия.

Долгое время для изучения патологии эндометрия использовался гистологический метод исследования. Однако он не позволял достоверно оценить рецептивную способность эндометрия, что породило потребность в поиске более информативных методов диагностики. Одним из них стала иммуногистохимия, которую в настоящее время используют в следующих целях:

1. Исследование структурных особенностей эндометрия.
2. Определение способности эндометрия к имплантации.
3. Определение негативных факторов наступления беременности, например, гиперэкспрессии альфа-эстрогеновых рецепторов в железистых и стромальных клетках в среднелютеиновую фазу, снижение прогестерон+ стромальных клеток.
4. Определение благоприятных факторов наступления беременности — оптимальное соотношение прогестероновых и эстрогеновых рецепторов, количество эндометриальных эпителиоцитов с пиноподиями более 50 %.
5. Оценка восприимчивости эндометрия к гормонам. На основании полученной информации корректируют дозу гормональных препаратов, используемых на этапах планирования и проведения ЭКО.
6. Определение иммунокомпетентных клеток-киллеров, препятствующих наступлению беременности.

Где можно сделать?

Иммуногистохимия является частью комплекса обследований, назначаемых лечащим врачом в зависимости от той проблемы, которая беспокоит пациента.

Но при желании можно и самостоятельно обратиться непосредственно в лабораторию, оснащенную соответствующим оборудованием.

В Москве к таковым относятся следующие медицинские учреждения:

В указанную стоимость входит комплексное исследование. Однако можно заказать исследование на одно антитело.

В ЛДЦ «Кутузовский» такая услуга обойдется в 5900 руб. Пересмотр готового препарата специалистами клиники будет стоить 2800 руб.

В Санкт-Петербурге цены несколько ниже, но и количество предложений значительно меньше. Комплексное ИГХ исследование в клинике МЧС обойдется желающим в 10 000 руб.

Конечно, иммуногистохимия – не самая дешевая процедура, но нельзя забывать, во всем, что касается медицины, а, тем более онкологических патологий, ставки очень высоки.

Не стоит экономить на собственном здоровье и отказываться от такого необходимого гистологического исследования.

Проведение исследования

Проводится трепанобиопсия путем забора кусочка ткани из места предполагаемой опухоли. На груди у женщины маркером отмечается черная точка. Если была проведена операция, то иссеченный материал также подходит для изучения. Затем ткань проходит следующие этапы:

• отправляется в лабораторию;
• помещается в емкость с формалином;
• обезжиривается;
• заливается жидким парафином для получения блоков с целью изучения на гистологию;
• с блоков делаются срезы толщиной в 1 мм, помещаются на специальные стекла;
• срезы окрашивают препаратами или антителами для иммуногистохимии;
• через 10-12 дней лаборанты интерпретируют результаты.

Исход благоприятен после терапии гормональными препаратами, если Ki-67 в анализе, как показатель на онкогенность, не превышает 15-17%. Если доходит до 35% в составе ткани, то опухоль имеет стремительное развитие. В данном случае приостановить ее можно только химиопрепаратами. При превышении показателя Ki-67 в 85-95% летальный исход вероятен практически в каждом случае.

Статус рака – HER2

Именно рецепторы HER2, лежащие на поверхности клеток, являются некими “антеннами” для улавливания химических сигналов или команд, отдаваемых организмом клеткам. Рецепторы должны быть в норме, а клетки молочной железы – своевременно делиться и восстанавливаться.

У многих женщин так называемый ген HER2 начинает давать сбой, вырабатывая множество рецепторов. Клетка, получая опасный сигнал, начинает быстрее делиться и размножается уже бесконтрольно. Когда врачи утверждают, что иммуногистохимическое исследование указывает на статус HER2, это значит следующее: диагностирован рак молочной железы, его начальная стадия.

У каждой женщины при подозрении на рак определяется статус опухоли. Для чего это нужно? Конечно же, для назначения правильной терапии. Статус постепенно может трансформироваться из положительного в отрицательный. Иммуногистохимия выявляет степень онкогенных клеток в забранной патологической ткани. При раке же и карциноме молочной железы рецептор или белок превышает свое процентное содержание. Клетки становятся неуправляемыми и начинают неконтролируемо делиться, расти.

Расшифровка анализа

Исследуется структура взятой ткани, количество атипичных антител, по которым и будет определен вид рака.

Интерпретация или расшифровка анализа проводится онкологом, который и должен донести до пациента всю полученную информацию. В результате (на бланке анализа) обязательно прописываются показатели Ki 67, указывающие на степень озлокачествления опухоли. Кроме того, обследуется гормональный фон женщины, от которого напрямую зависит поведение новообразования, степень его прогрессирования и скорость появления метастазов.

Иммуногистохимическое обследование диагностирует стадию, форму и степень развития онкологии, после чего и будет подобрано самое оптимальное лечение. Если гормональный фон в норме, но опухоль неактивна, лечение может ограничиться назначением пациенткам гормональных препаратов. При излишней активности опухоли, то есть при повышении показателей Ki 67, уже не обойтись без назначения более тяжелых химических средств.

Клетки в здоровом организме должны самостоятельно восстанавливаться и нормально делиться. Значит, при позитивном HER2 рак будет прогрессировать, а опухоль станет быстро увеличиваться в размерах. Для подавления стимуляции роста новообразования при положительном HER2 лечение назначается медикаментозное (Герцептин, Лапатаниб). Если HER2 отрицательный или негативный, то лечение иное – с назначением более действенных химиопрепаратов.

ИГХ считается сложным и многоступенчатым методом. Используется много маркеров, и расшифровать результаты иммуногистологических анализов правильно под силу лишь специалистам. Обычно при выявлении онкологии у женщин собирается целый консилиум врачей, чтобы более адекватно распланировать и выбрать всю последующую тактику лечения.

ИГХ важен для врачей с целью выбора правильной тактики при назначении лечения, для дачи прогнозов на будущее

Игх при раке молочной железы: исследование игх при онкологии молочной железы, типы рака молочной железы по игх

ИГХ при раке молочной железы — необходимость современной онкологии. Его результаты позволяют подобрать максимально подходящее женщине противоопухолевое лечение.

Что такое иммуногистохимия при РМЖ?

Иммуногистохимический анализ или коротко ИГХ основан на способности иммунитета синтезировать вещества, нейтрализующие инородные агенты — бактерии, вирусы, грибы и выделяемые ими токсины. Инородные агенты — это антигены, в их присутствии иммунные клетки вырабатывают определённое антитело, на каждое антитело имеется свой антиген.

Рак молочной железы умело скрывается от санкций иммунитета, тем не менее раковые клетки и их структурные элементы — антитела, иммунитет их не видит, но ИГХ выявляет эти антитела.

При ИГХ кусочек опухоли обрабатывают реагентами с антигенами, которые находят своё антитело и соединяются с ним, изменяя окраску исследуемого кусочка злокачественной ткани.

Для чего проводят иммуногистохимию при РМЖ?

Иммуногистохимия нужна не для научной работы, а для практического использования:

1. Обнаружение в клетках рецептора половых гормонов, чувствительного к эстрогену (ЭР) или прогестерону (ПР), прогнозирует чуть более плавное течение рака с меньшей вероятностью метастазирования, с преимущественной локализацией метастазов в костях, большую продолжительность жизни даже при генерализации процесса;
2. Разная концентрация ЭР и ПР позволяет выбрать для конкретной женщины оптимальное лечение, так при высоком уровне ЭР в сочетании с ПР и даже без них можно рассчитывать на хороший результат гормональной терапии, без рецепторов обязательна химиотерапия;
3. Наличие в клетке НЕR2 в высокой концентрации указывает на агрессивность рака, что требует химиотерапии и специфического нейтрализатора НЕR2;
4. Сочетание позитивного гормонального статуса с НЕR2 вызывает сомнения в результативности гормонотерапии, поэтому в программу лечения включается химиотерапия;
5. Высокая концентрация Ki-67 — свидетельство высокой степени злокачественности и, опять-таки, не позволяет избежать химиотерапии.

Показания к иммуногистохимии при РМЖ

При раке молочной железы для ИГХ только одно показания — определение степени агрессивности рака по его структурным компонентам для подбора оптимальной программы лечения.

Обычный морфологический анализ — гистология показывает степень злокачественности опухоли и её клеточный состав, часто неоднородный, но не позволяет определить белковые структуры:

• Чувствительность каждой клетки к лекарствам определяется наличием у нее рецепторов половых гормонов;
• Активность клеточного размножение и скорость роста ракового узла контролирует белок НЕR2, если его слишком много, то рак будет расти быстрее и формировать защиту клетки от лекарств вплоть до полной устойчивости;
• Способность быстро воспроизводить замену погибшим клеткам, захватывая при этом новые территории, определяет маркер пролиферации Ki-67.

Концентрацию всех этих клеточный субстанций и определяет ИГХ.

Подготовка к исследованию

ИГХ при раке молочной железы проводится вне организма больной, но с кусочком её опухоли. Сегодня всем женщинам с впервые обнаруженным новообразованием в железе на этапе диагностики специальной иглой выполняется биопсия — кор-биопсия.

Взятый небольшой столбик раковой ткани подвергается гистологическому исследованию и ИГХ, что позволяет верифицировать, то есть доказать наличие рака, и планировать первичное лечение. Удалённую во время операции на молочной железе опухоль тоже подвергают гистологическому и ИГХ исследованиям для уточнения плана лечения.

Женщине перед биопсией надо только успокоиться, никакой определенной подготовки от неё не требуется.

О чем говорят результаты?

Обнаружение в раке молочной железы рецепторов ЭР и ПР предсказывает относительно доброкачественное течение при эффективности гормональных препаратов, но в реальной жизни опухоль может не среагировать на эндокринную терапию, правда процент устойчивости невысок.

Обнаружение Ki-67 прогнозирует неспокойную жизнь и интенсивное лечение с использованием максимальных возможностей химиотерапии для изменения негативного прогноза болезни.

Рецептор НЕR2 — прогностический фактор, предлагающий сосредоточение на химиотерапии без особых надежд на антигормональное воздействие, но с другой стороны, предсказывает необходимость использование таргетного препарата, связывающего патологический белок.

Гистология груди

Гистологический анализ ткани, полученной из опухоли груди — требует предварительной пропитки спиртами и парафином (чтобы его можно было тонко порезать), затем необходимо удалить парафин, покрасить (разными способами — на разные свойства опухоли) и рассмотреть под микроскопом (желательно — у опытного специалиста).

Технологически процесс занимает время — от 2 до 7 дней и зависит от оборудования; будут ли весь агрегат запускать для одного пациента или для группы (в целях экономии реактивов); и будут ли задействовать и специально вызывать опытного специалиста, коих остались единицы.

Ответ пункции

Неопытный специалист в заключении гистологии даёт уклончивые ответы — чтобы они подходили во всех ситуациях, избегая категоричности и конкретики. Такой специалист маскирует свой непрофессионализм в заключении следующими фразами: «Рекомендовано углублённое исследование…» или «Материала недостаточно для …», «Достоверно судить о … не представляется возможным…» Опытный такие обороты речи использует 1-2 раза в жизни.

Как проходит процедура

На иммуногистохимический анализ попадает образец ткани, взятый с помощью биопсии. Это способ забора биоматериала с помощью тонкой иглы. Её вводят в тело пациента и шприц-системой втягивают ткань опухоли. Образец проходит подготовку:

• Фиксация с помощью парафина.
• Изготовление срезов.
• Распределение срезов по стеклам.
• Обработка образцов антителами и красителями.

Перед исследованием биоматериал хранится в формалине. Это позволяет использовать единственный образец долгое время, чтобы не травмировать пациента. Биопсия бывает болезненна, если опухоли расположены в труднодоступных местах. Злокачественные образования в головном мозге по возможности удаляют оперативно, на анализ попадает непосредственно опухоль

Важно сохранить материал, так как опухоли бывают размером до 1 см. По результатам теста строится программа лечения

Впрочем, в этом случае иммуногистохимия обладает преимуществом.

Работа с материалом биопсии

Что такое иммуногистохимия?

Иммуногистохимия

Раковые клетки производят определенные белки, у которых есть связь с антителами. ИГХ позволяет изучить взаимодействие между ними. Во время исследования используются стандартные антитела. Учитывая определенные изменения при взаимодействии клеток, медики определяют структуру и форму злокачественного новообразования.

Опухоль для человеческого организма является чужеродной. Во время борьбы с ней в теле пациента вырабатываются антитела. Иммуногистохимия помогает обнаружить раковые клетки, определяет их структуру и строение.

Для врачей подобное исследование важно тем, что по результатам они подбирают максимально эффективное лечение пациентам. При помощи ИГХ можно определить:

• развитие опухолей;
• рецепторы стероидных гормонов;
• образование злокачественной опухоли, если первичные признаки очага отсутствуют;
• формирование новообразования без классификации;
• количество мембранного белка (HER2) в клетках молочной железы.

Результатами исследования занимается специалист онколог

Важно определить количество гормональных рецепторов в молочных железах. Чем больше показатели, тем опухоль спокойнее и медленнее растет

У пациента высокие шансы, чтобы полностью избавиться от рака на ранней стадии развития.

Гормональная терапия в таких ситуациях позволяет добиться положительного исхода на 80%.

Женские гормоны и опухоли

Как говорит современная медицина, большинство опухолей женской половой сферы являются зависимыми от гормонального уровня организма. На их развитие активно влияют женские половые гормоны — прогестерон и эстроген. Рецепторы к этим гормонам определяют образование и развитие онкозаболевания. Установленная гормональная зависимость позволяет достаточно четко определить схему лечения с последующими жизненным прогнозом. К тому же эти рецепторы играют свою роль не только в онкологических заболеваниях молочных желез, но и в таких серьезных проблемах, как женское бесплодие, эндометриоз и раковые болезни половой сферы — матки, яичников, шейки матки. Герцепт-статус опухоли, который устанавливается во время ИГХ-исследование эндометрия, например, позволит назначить лечение именно теми препаратами, которые помогут добиться адекватного результата без излишних экспериментов с подбором лекарственных средств в каждом конкретном случае.

Как работает метод

В названии метода соединились три отрасли – иммунология, гистология и химия. Для анализа используют химические вещества. Реактивы насыщены антителами, находящими раковые антигены. Антитело – это белок, его структура притягивает антиген. Белок окрашивают ферментами, красителями, которые проявляются при положительной реакции.

Теоретические основы иммуногистохимии заложены в 40-е годы 20-го века. С помощью флуоресценции находили антигены в замороженных клетках. Затем стали использовать окрашенные ферментами антитела. Установили соответствия цветовой реакции и типа раковых клеток. Также определили гормоны и их рецепторы.

Практическое применение методов ИГХ:

• Определение типа клеток;
• Изучение секреторных внутриклеточных процессов и особенностей клеточного синтеза;
• Определение гормонов и гормональных рецепторов.

Клетки под микроскопом после иммуногистохимии

Виды:

• Прямой метод – маркированные антитела соединяются с искомыми антигенами.
• Непрямой, «антиген-антитело» – неотмеченные антитела находят антигены, потом их соединения обнаруживают вторичные отмеченные антитела.

Цвет реакции показывает статус опухоли.

Что выявляет

Главная цель проведения ИГХ – выявление причин бесплодия, но в ходе исследования нередко обнаруживают различные изменения в эндометрии. По этой причине анализ назначается в случае подозрения на хронический эндометрит, не сопровождающийся характерной симптоматикой.

При получении результатов удается выявить такие нарушения, как:

• неполная трансформация маточного слоя;
• развитие эндометрита;
• нарушение фаз развития эндометрия;
• гиперплазия.

Процедура подразумевает выскабливание полости матки. После этого полученный биоматериал тщательнейшим образом исследуется. Кроме того, удается высчитать промежуток времени, когда отмечается точное соответствие маточного слоя и эмбриона. В норме этот период наступает с 20–24-х суток цикла.

Негативное влияние ИГХ на организм человека

Иммунногистохимическая методика диагностики грудных желез не провоцирует никаких отрицательных последствий для здоровья пациентки. Неприятными моментами является:

1. Возникновение боли на этапе проведения биопсии, однако практически всегда область груди для проведения манипуляции обезболивается анестезирующим средством.
2. Занесение инфекции при игнорировании правил антисептики, что может привести к воспалительному процессу.
3. Проявление мигрени, как реакция на анестетик. В данной ситуации головная боль носит временный характер и купируется обезболивающими средствами

ИГХ-анализ — своевременное знание

Проблемы со здоровьем должны быть вовремя обнаружены и идентифицированы. Для этого-то и нужны всевозможные методы обследований, анализы. ИГХ-исследование — один из наиболее распространенных методов диагностики новообразований или других проблем с тканями различных органов. Исследование ИГХ проводится на взятом для определения проблемы материале — так называемом биоптате. Материал окрашивается специальными веществами для каждой конкретной цели, и с помощью визуального сравнения, проводимого врачом-гистологом, устанавливаются онкомаркеры, показывающие ту или иную проблему. Несовершенство иммуногистохимического исследования состоит в том, что материала может быть недостаточно, сыграет свою роль человеческий фактор, или же внешние причины не позволят установить точную картину проблемы. В любом случае для адекватной диагностики заболевания, тем более онкологического, необходимо проводить целый комплекс обследований, где одной из ступеней будет ИГХ-исследование. Что это такое при раке какого-ибо органа, ткани? Биоптат исследуется на онкомаркеры, позволяющие оценить их наличие в образце. Как помощь в постановке диагноза ИГХ-исследование незаменимо, также оно активно используется в установлении причин женского бесплодия.

Медицина, и диагностическая в том числе, постоянно развивается. Возможно, в ближайшем будущем иммуногистохимическое исследование будет доведено до совершенства и позволит многим людям поставить адекватный диагноз с наименьшими затратами времени и сил.

Суть методики

При раке наблюдается продуцирование опухолевидными клетками специальных белков, доказана связь между ними и антителами. Метод позволяет исследовать ткань путем использования стандартных антител, которые при взаимодействии с раковыми клетками начинают излучать свечение разной волновой длины. Новообразование же диагностируется в случае выявления подобного свечения с разной длиной волны в исследуемом биоптате.

Опухолевидные клетки в организме являются чужеродными. Организм в борьбе с ними начинает вырабатывать антитела. ИГХ-исследование, как бы в помощь “человеческим” антителам, легко обнаруживает раковые элементы, если таковые имеются. Причем оно способно определить их доскональную структуру, строение.

При раке наблюдается продуцирование опухолевидными клетками специальных белков, доказана связь между ними и антителами

ИГХ важен для врачей с целью выбора правильной тактики при назначении лечения, для дачи прогнозов на будущее. Для больных онкологией этот метод позволяет выявить:

• рецепторы стероидных гормонов;
• возможное развитие лимфомы (ходжкинской, неходжкинской);
• гистогенез опухоли в случае неопределения первичных очагов новообразования;
• развитие неклассифицируемой опухоли;
• процентное соотношение HER2 в клетках молочных желез.

Полученные результаты интерпретируются специалистом-онкологом

Как правило, при исследовании наиболее важно определить количество рецепторов эстрогена и прогестерона в молочных железах. При множестве таких элементов опухоль обычно ведет себя неагрессивно и растет медленно

Для пациентов же это шанс излечиться при выявлении онкологии на раннем этапе. Своевременная гормонотерапия даст положительный исход в 70-80% случаев.

Анализ может быть назначен при подозрении на рак молочных желез и при неприятных симптомах. Обычно иммуногистохимия проводится с целью выявления первичной опухоли, т. е. одиночного новообразования. Но и метастазы ИГХ обязательно выявит, если таковые фактически есть.

Иммуногистохимическое исследование как процедура не имеет особых противопоказаний, поэтому может быть назначено любой женщине при подозрении на рак. Выявление опухоли на начальном этапе дает больше шансов излечиться. Хотя забор ткани – дело не из приятных, но пациенткам рекомендуется потерпеть, чтобы наслаждаться жизнью без онкологии и в полной мере в дальнейшем.

Кроме определения опухоли в молочных железах, рекомендуется проходить иммуногистохимическое исследование женщинам при патологии в репродуктивных органах, подозрении на бесплодие или заболеваниях в полости матки.

Эндометрий также подлежит забору, если были неудачные попытки ЭКО или беременность заканчивалась выкидышами, невынашиванием малыша. Возможно, какие-либо клетки в эндометрии препятствуют зачатию. ИГХ выявит степень реагирования тканевых рецепторов в матке на гормоны. Подобная стимуляция клеток укажет на неполадки и видоизменение эндометрия, поможет врачам определить правильные методы лечебного воздействия.

Кому показано

Основным показанием к назначению иммуногистохимии являются злокачественные новообразования. В онкологии данный метод применяется для поиска метастазов и патологических микроорганизмов, определения вида и локализации опухоли, а также с целью оценки активности патологического процесса. С помощью ИГХ можно установить окончательный или, реже, промежуточный диагноз при раке кожи (меланоме), саркоме, лимфогранулематозе, лимфолейкозе и лейкозе, типировать степень злокачественности процесса

Последнее крайне важно при нейроэндокринных образованиях, которые еще называют «скрытыми убийцами» из-за того, что их очень трудно распознать на ранних стадиях

В отдельных случаях иммуногистохимический анализ позволяет установить источник метастазов, когда локализация первичного очага неизвестна, а также провести дифференциальную диагностику при нескольких новообразованиях разного происхождения.

ИГХ может назначаться при бесплодии, хронических патологиях эндометрия, матки и яичников, привычных выкидышах. Ее целесообразно делать и в том случае, если беременность не наступает после нескольких процедур ЭКО.

Методом ИГХ оценивают и лекарственную чувствительность путем выявления:

• рецепторов половых гормонов – эстрогена, прогестерона и андрогенов. Необходимо при поражении женской репродуктивной системы;
• фактора роста опухоли Her2/neu. Биомаркер и терапевтическая мишень агрессивных типов рака груди;
• соматостатиновых рецепторов 2а и 5 типа, важных при карциноидах;
• мембранного белка иммуноглобулинов PD-L1, гена ALK и рецептора тирозинкиназы ROS. Данные показатели исследуются преимущественно при немелкоклеточном раке легких;
• микросателлитной нестабильности;
• индекса пролиферативной активности.

Трудно переоценить важность микросателлитной нестабильности (MSI), которая существенно расширяет прогностические и лечебные возможности у пациентов со злокачественными поражениями ЖКТ. Новообразования с низкой MSI медленнее растут и реже дают метастазы

Поэтому своевременное выявление MSI позволяет избежать назначения агрессивной, но заведомо неэффективной терапии.