Посевы на флору и чувствительность к антибиотикам: зачем нужны микробиологические исследования

Правила сбора мочи

Собирать урину для анализа необходимо по такому алгоритму:

1. Выполняется покупка стерильного пластикового контейнера, куда и будет выполняться забор урины. Контейнер можно приобрести в аптеке.
2. Производится тщательная очистка половых органов. Для подмывания рекомендуют применять теплую воду, запрещено использование гелей для душа и мыла.
3. Для получения правдивого результата исследования требуется выполнять сдачу средней дозы мочи. На протяжении пары секунд рекомендуется помочиться в унитаз, после чего – в стерильную баночку, и закончить процесс мочеиспускания опять в унитаз.
4. После сбора необходимого объема жидкости ёмкость подвергается плотному закрытию. Нельзя прикасаться к внутренней части контейнера, потому что это искажает итоговый результат.
5. Собранный материал как можно быстрее нужно отправить в лабораторию. Срок хранения биоматериала равен 6 часам, и это при условии, что урина будет храниться в затемнённом и прохладном месте.

Чтобы выявить наличие болезнетворных микроорганизмов, нужно использовать только утреннюю урину (её сбор должен осуществляться сразу после того, как человек проснется). В ряде ситуаций врач настаивает на сборе мочи на протяжении дня. В этой ситуации требуется соблюдать одно правило: для исследования подходит только урина, выделенная не ранее чем, через 2-3 часа после предыдущего сбора биологического материала.

Порция урины, сдаваемая для изучения микрофлоры, должна составлять 5-10 мл. Иначе получить достоверный результат не получится.

Если у пациента присутствует катетер, забор урины производится строго под контролем медработника. Медсестра, используя пинцет, зажимает катетер, после чего выполняет стерилизацию спиртом и, используя иглу, осуществляет забор необходимого количества жидкости. После чего мочу переливают в специальный контейнер и отвозят на исследование. При сдаче урины на анализ рекомендуется указать не только данные пациента, но и время забора, применяемый метод и возможный диагноз.

Имеется у процедуры и существенный недостаток – длительность исследования. Довольно часто доктор вынужден назначить лечение ещё до получения результатов анализа.

Анализ на чувствительность к глютену

Существует множество тестов, при помощи которых можно определить иммунологическую чувствительность к различным веществам или патогенам. Раньше основным методом было проведение анализов, основанных на реакции агглютинации антител и антигенов. Сегодня эти анализы применяются все меньше, поскольку их чувствительность намного ниже, чем многие современные методики, например глютеновые тесты.  Чаще всего в практике прибегают к слюнному тесту на глютен и анализу кала.

Тест на чувствительность к глютену применяется для диагностики различных расстройств кишечника. Основан на реакции иммунной системы. Если в кал добавить глютен, реакция происходит, либо отсутствует. Это расценивается как ложноположительный или ложноотрицательный результат. Положительный указывает на предрасположенность к колитам, высокую вероятность его развития. Также подтверждает целиакию.

Также можно проводить анализ на глютен с использованием слюны в качестве биологического материала. Можно измерять количество антител к глиадину. Положительный результат указывает на чувствительность к глютену. Это может указывать на высокую вероятность диабета. Если в обоих тестах результат положительный, можно подтвердить иабет или целиакию. 

[], [], []

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков и серийных разведений

В медицине различают этиотропный и эмпирический подход к лечению препаратами. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам играет в этом разделении решающую роль.

Эмпирическое лечение подразумевает выяснение естественной бактериальной чувствительности и эпидемиологических сведений об устойчивости микроорганизмов.

Учитываются также данные клинических исследований, которые контролируются специалистами.

Преимуществом эмпирического подхода в назначении больному антибиотиков является то, что исключаются затраты времени, финансовых расходов на дополнительные, диагностически неинформативные исследования.

При полном отсутствии эффекта от такого лечения антибиотиками, назначают этиотропное. Назначение больному антибактериальных препаратов этиотропно подразумевает выделение возбудителя заболевания из биологического материала больного, определение чувствительности инфекционного агента к антибиотикам различных групп.

Методики установления восприимчивости

Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам разделяют на две группы. К диффузионным относятся методы:

• с применением дисков, включающих антибиотики;
• с применением Е-тестов.

Методики разведения для определения чувствительности выполняются:

• с применением жидкой среды питания (бульон) – метод серийных разведений;
• на агаре.

Согласно полученным данным, все бактерии разделяют на 3 типа:

• чувствительные;
• умеренно устойчивые;
• резистентные, согласно методике пограничных концентраций.

Пограничные концентрации зафиксированы в стандартизированных данных NCCLS (США). Данные нормы применяются в клинических либо микробиологических научных исследованиях чувствительности. Наиболее часто применяют методы дисков и серийных разведений.

Чувствительность бактерий к антибиотикам предполагает анализ результатов на основании двух принципов: клинический и морфологический. Клинически определяется эффективность ведения лечения, а морфологически оценивается распределение действующих антибиотиков.

Для клинической расшифровки результата исследования оцениваются в случае использования стандартизированных доз антибактериальных препаратов для заболеваний. Лечение дает хороший положительный эффект.

Устойчивые же к антибиотикам бактерии отличаются тем, что в процессе лечения не теряют своей жизнедеятельности и способности к размножению. Такие микробы именуются как резистентные.

Существует также группа с промежуточной резистентностью бактериальной клетки. Вызываемые такими бактериями заболевания могут успешно лечиться только при использовании максимальных дозировок антибактериального препарата.

Показатель чувствительности по МБК

Иногда проведенных результатов оказывается недостаточно. В таких случаях стоит определить минимальную бактерицидную концентрацию (МБК). Данный показатель отражает минимальное количество антибактериального препарата для ликвидации микробов практически на 100% на протяжении некоторого времени.

Методика с применением дисков

Исследование чувствительности бактерий к антибактериальным препаратам методом дисков заключается в засевании исследуемой культуры бактерий на среду АГВ либо питательный агар.

Затем на засеянный участок при помощи пинцета располагают специальные диски из бумаги, содержащие разные дозы лекарственных средств.

Для наиболее точных результатов рекомендуется применять стандартные питательные среды и диски. Методика дисков не отличается 100% достоверностью. Большей информативностью обладает метод серийных разведений.

Серийные разведения и их значение

Метод серийных разведений позволяет определить минимально возможную концентрацию антибактериального препарата, которая угнетает рост и размножение микробов. Начинают с приготовления основного раствора с содержанием специального растворителя и медикаментозного средства.

Затем к каждому разведению прибавляют по 0,1 мл культуры бактерий (до 107 микробов в 1 мл), одна из них (последняя) – контрольная. Затем также выжидают сутки при температуре 37°С. Все пробирки мутнеют (кроме контрольной).

В результате сравнения степени помутнения с эталоном определяют, какая бактерия подлежит устранению.

Оценивают результаты метода серийных разведений соответственно таблицам пограничных значений. При применении метода серийных разведений определяют группы чувствительных, умеренно устойчивых и устойчивых бактериальных микроорганизмов.

7.7.1. Общие положения

Критерием
чувствительности микробов к антибиотикам
считают их концентрации в сыворотке
крови и других биотопах макроорганизма
после введения среднетерапевтических
и высших доз препарата. Мерой
чувствительности микробов является
минимальная
концентрация препарата
(мкг или ед/мл), которая подавляет рост
микробов на питательных средах в
стандартных условиях постановки опыта.

Для
характеристики
чистых культур и популяции бактерий
часто используют следующие показатели:

—
МИК (минимальная ингибирующая концентрация)
или МПК (минимальная подавляющая
концентрация) соответствует наибольшему
разведению препарата, тормозящему рост
исследуемой культуры в стандартных
условиях опыта. Устанавливают посевом
испытуемой культуры на плотные или
жидкие среды, содержащие различные
концентрации антимикробного препарата.

—
МИК₅₀
– к данной концентрации антибиотика
чувствительно 50% исследуемых штаммов;

—
МИК₉₀ –
к данной концентрации антибиотика
чувствительно 90% исследуемых штаммов;

—
МБК–минимальная
бактерицидная концентрация; минимальная
концентрация антимикробного препарата,
вызывающего полную гибель бактерий в
стандартных условиях опыта. Как и МИК,
устанавливают посевом испытуемой
культуры на плотные или жидкие среды,
содержащие различные концентрации
антимикробного препарата. Однако в
дальнейшем из стерильных зон или
прозрачных пробирок делают высев на
среды без препарата. Появление роста
указывает на статическое действие
препарата в данной концентрации,
отсутствие – на бактерицидное. Обычно
МБК соответствует либо превышает
величину МИК.

Адекватная
концентрация антибиотиков должна быть
достигнута в месте локализации инфекции.
Концентрация антибиотиков в месте
локализации инфекции должна равняться
или превышать МИК для данного возбудителя.
Для антибиотиков аминогликозидов,
фторхинолонов и амфотерицина В характерен
доза-зависимый
эффект,
микроорганизмы элиминируются быстрее,
когда концентрация антибиотика
значительно выше МИК для возбудителя.
В то же время для b-лактамных
антибиотиков, гликопептидов характерен
время-зависимый
эффект,
поэтому необходимо более строго соблюдать
интервалы между введениями препарата.

По
степени чувствительности к антибактериальным
препаратам бактерии разделяются на
чувствительные,
умеренно
чувствительные
(промежуточные) и устойчивые
(резистентные).

К
чувствительным
относят культуры, рост которых подавляется
концентрациями препарата, создаваемыми
в сыворотке крови больного в процессе
назначения среднетерапевтических доз
антибиотиков.

Умеренно
чувствительные
(умеренно-устойчивыми) считаются
культуры, подавляемые концентрациями,
которые могут быть достигнуты при
введении максимальных (высших) доз
препарата.

Устойчивые
(резистентные)
– рост которых не подавляется при
введении даже максимально допустимых
доз препарата, бактериостатический
эффект может быть достигнут только in
vitro при
высоких концентрациях лекарственного
препарата, являющихся токсичными для
человека.

Антимикробная
активность одного и того же антибиотика
не всегда совпадает при испытании его
в пробирочных опытах и при лечении
больного, что вызвано активацией или
инактивацией его в результате
метаболических реакций макроорганизма,
неадекватности условий, в которых
проявляется действие антибиотика, и
гетерогенностью микробных популяций
по признаку устойчивости к антибиотикам.

Определение
чувствительности микроорганизмов к
антибиотикам основано на двух основных
принципах:

1)
диффузии препарата в агар из бумажных
дисков, полосок или лунок (в настоящее
время существуют две основные модификации
диффузионного метода: дискодиффузионный
и Е-тест);

2)
серийных (стандартных) разведений в
бульоне или в плотной питательной среде.

Анализ на основе мочи

Как уже было сказано ранее, анализ должен проводиться на основе стерильных выделений организмов. К ним в первую очередь относится моча.

Анализы на основе мочи показаны пациентам с заболеваниями в мочевыделительной системе.

К симптомам таких заболеваний относятся:

• боли при мочеиспускании;
• боли в поясничном отделе;
• нарушения в процессе мочеиспускания;
• изменения в результатах проведённых анализов мочи;
• реакция на применение антибиотиков в органах, отвечающих за мочевыделение.

Для того чтобы провести такой анализ, понадобится утренняя порция мочи. Её нужно собрать в специальную стерильную ёмкость. Эту ёмкость можно как купить, так и использовать любую подходящую домашнюю ёмкость, например, простую небольшую баночку. Однако перед использованием её нужно простерилизовать.

При сборе не нужно использовать первые капли мочи и последние. Именно так на анализ попадёт наиболее концентрированная микроорганизмами, если они есть, моча.

Следует предупредить врача, если за несколько дней до сдачи образца принимали антибиотики. Они могут вызвать ложный результат.

Анализ займёт до десяти дней. Продолжительность исследования зависит от микроорганизмов. За эти десять дней моча будет подвергнута ряду анализов, в результате которых врач получит представление о возбудителе заболевания, его чувствительности и об антибиотике, с помощью которого будет проведено наиболее эффективное лечение.

Что такое устойчивость к антибиотикам?

Представьте себе ситуацию, когда программист борется с хакером. Чем более совершенную антивирусную программу создаст ИТ-специалист, тем более сложные вирусы будет создавать хакер. После каждого нового вируса, который проник в систему и не был обнаружен и удален существующей антивирусной программой, ИТ-специалист должен подготовить улучшенный алгоритм. Когда на рынке появляется последняя антивирусная программа, хакеры уже начинают работать над другим вирусом, устойчивым к этой программе.

Устойчивость к антибиотикам – аналогичное явление, только оно возникает, когда бактерии приобретают устойчивость. Чем лучше и эффективнее антибиотик представлен на рынке, тем больше бактерий сосредоточено на изменении своих свойств, нейтрализующих свойства нового препарата. Так возникает устойчивость к антибиотикам. 

С этой целью бактерии могут изменять свой генетический материал таким образом, что устойчивость к новому антибиотику становится их постоянной характеристикой, передаваемой будущим поколениям. Если с последующей серией лекарств, созданных учеными, бактерии приобретают устойчивость к воздействиям, то мутации в бактериальной ДНК накапливаются и образуют бактериальные штаммы, устойчивые практически к большинству антибиотиков. Этот процесс является основой бактериальной устойчивости к антибиотикам.

Устойчивость к антибиотикам

Диффузионные методы

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал. Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста». Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.

Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком. После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги. Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.

Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.

Показания к проведению посевов на флору и чувствительность к антибиотикам

• Любые урогенитальные патологии, в том числе ЗППП. Этот метод диагностики особенно рекомендуется при инфекциях, трудно поддающихся лечению.
• Проблемы с кишечником. Анализ высевает все основные кишечные группы и позволяет подобрать не только антибиотики, но и пробиотики.
• Любые гнойные поражения – язвы, раны, лактационный мастит. С помощью посева можно понять, какие микробы вызывали нагноение, и подобрать антибиотик.
• Беременность – в этот период делаются посевы из носоглотки, чтобы выявить микрофлору, опасную для будущего малыша.
• ЛОР-инфекции и поражение дыхательных путей. Проведение бакпосева рекомендуется при затяжных ринитах, фарингитах, частых ангинах. Это позволит выявить микроорганизмы, вызывающие указанные заболевания.
• Анальный зуд – в этом случае нужно сдать посев на грибок молочницы, который часто вызывает такой симптом.
• Обследование детей перед поступлением в дошкольное учреждение и школу, поездкой в детский лагерь или санаторий.
• Профосмотр работников, занятых в пищевой промышленности или работающих с продуктами питания.

Посевы в гинекологии

Бак посев флоры из цервикального канала — это исследование слизистой оболочки шейки матки, которое гинекологи проводят при подозрении на наличие воспалительных процессов в женских половых органах. Целью этой диагностики является выявление количества патогенных и полезных микроорганизмов, составляющих флору канала.

Данные анализы помогают правильно определить в первую очередь такие виды микробов как: энтеробактерии, кишечная палочка, клебсиелла, грибы и пр. Это исследование бывает весьма актуальным при вынашивании и подготовке к беременности: сдать бак посев назначают практически всем женщинам, ожидающими ребенка.
 

Какие инфекции выявляют

Исследование направлено на обнаружение роста клинически значимых бактерий:

• энтеробактерий (родов Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Proteus и др.);
• неферментирующих грамотрицательных бактерий (родов Pseudomonas, в т.ч. Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter, Moraxella и др.);
• стрептококков (Streptococcus agalactiae (group B), Streptococcus pyogenes (group A) и др.);
• энтерококков (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium и др.);
• стафилококков (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus и др.);

Кроме того, бак посевы из цервикального канала и влагалища на флору дают возможность проверить, какое лекарство лучше всего убивает обнаруженного микроба. Для этого проводятся тесты на чувствительность к антибиотикам и бактериофагам на современных анализаторах. Выбор спектра антибиотиков зависит от выявленного возбудителя и соответствует лучшим международным стандартам лабораторной диагностики. Пробы на определение восприимчивости к антибактериальным прапаратам проводятся в случае обнаружения роста флоры, выявленной в анализе бак посева в клинически значимом количестве более 104 ККОЕ/тамп.
 

Технические моменты

Биологический материал для исследования:

1. Секрет предстательной железы
2. Мазок/отделяемое из влагалища
3. Аспират полости матки
4. Мазок/отделяемое из уретры
5. Мазок/отделяемое из цервикального канала

Показания к сдаче анализа на бак посев:

1. Диагностика состояния микрофлоры;
2. Наличие симптомов воспалительных заболеваний;
3. Подбор препаратов для антибактериальной терапии;
4. Оценка эффективности пройденного лечения.

Кто может сдать бак посев

1. Женщины
2. Девушки-девственницы
3. Девочки-подростки
4. Мужчины

Сколько делается анализ бак посев.
Результат бак посева с расшифровкой титра микробов и подбором антибиотиков можно получить в клинике через 6-8 рабочих дней.

Как сдавать бакпосев

Взятие материала из уретры делают не ранее, чем через 3 часа после последнего мочеиспускания. Забор отделяемого из влагалища и из цервикального канала — обязательно вне менструации.

Как сдать мочу на бак посев правильно.
Сбор мочи проводится после тщательного туалета наружных половых органов, рекомендуется ввести тампон во влагалище, развести половые губы пальцами для предупреждения загрязнения образца мочи отделяемым из влагалища и с поверхности половых губ. Не следует производить сбор анализа во время критических дней. Собирать для бак посева следует среднюю порцию мочи, объёмом не более чем на 3/4 контейнера. Закрыть контейнер крышкой.

Как и откуда берут бак посев у женщин. 
Взятие материала для бактериологического исследования возможно из следующих мест:

1. Наружные половые органы
2. Стенки влагалища
3. Шейка матки (цервикальный канал)
4. Уретра
5. Задний проход (анальный канал).

У девочек-девственниц анализ мазка на бак посев может браться из  всех вышеперечисленных мест, за исключением шейки матки. Правильно и аккуратно проведенный забор абсолютно не болезненен, какое-либо повреждение плевы исключено.

av_timer

Где сдать бак посев

Адрес клиники:
Москва, 121165, Кутузовский пр-т, д. 33.

Часы взятия материала:
с 10-00 до 21-00 рабочие дни,
с 10-00 до 18-00 выходные.

Онлайн сервис:
• Запись к гинекологу и на анализы
• Записаться только на сдачу бак посева

Узнать больше:

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой гонореей и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться  и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью  окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает хламидийная инфекция, приносящая большой вред не только при беременности. Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Анализ на дисбактериоз с чувствительностью

Материалом для исследования служит кал, взятый непосредственно после акта дефекации. Нормальная микрофлора ЖКТ состоит из представителей нормальной флоры и нескольких представителей патогенной флоры. Их видовой состав, количество и соотношение строго обозначены и держатся в пределах допустимой нормы. Если такое соотношение нарушается, развивается дисбактериоз. Он может проявляться по-разному. Могут развиваться инфекционные заболевания, если резко увеличивается количество патогенной микрофлоры. Если количество какого-либо микроорганизма резко снижается, свободное место занимают другие представители, которые не свойственны ЖКТ, или же патогенные. Часто свободное место занимает грибок, тогда развиваются различные грибковые поражения, кандидозы.

Для того чтобы определить количественный и качественный состав микрофлоры кишечника, проводят анализ кала на дисбактериоз. Условно всех представителей, обитающих в кишечнике, разделяют на три группы: патогенные, условно-патогенные и непатогенные. Соответственно, анализ состоит из трех частей. Каждая группа микроорганизмов имеет свои потребности в источнике питания, энергии. Для каждой группы нужны отдельные питательные среды и селективные добавки.

Сначала проводят микроскопию и первичный посев. Затем после посева отбирают наиболее крупные колонии, по морфологическим признакам похожие на представителей каждой группы. Производят пересев на селективные среды. После того, как микроорганизмы выросли, производят их идентификацию и сразу же проводят тест на чувствительность к антибиотиком. Применяются стандартные микробиологические методы.

Исследование группы патогенных микроорганизмов, кроме стандартных исследований, подразумевает определение бактерий тифа, паратифа и дизентерии. Также определяется, является ли человек носителем этих микроорганизмов. Комплексное исследование на дисбактериоз включает также исследование представителей группы бифидобактерий и лактобактерий. Исследование занимает порядка недели и зависит от скорости роста микроорганизмов.

[], [], [], [], [], [], [], [], []

Показания к анализу

Антибиотики необходимы не только для лечения, но и в целях профилактики развития воспалительных процессов при проведении некоторых видов медицинских манипуляций, таких как цистография, удаление камней из почек и мочеточников.

Этот тип анализа важен в тех случаях, когда у пациента имеется аллергия на лекарственные препараты, и требуется один заменить другим с таким же действием и эффективностью.

Анализ назначается в следующих случаях:

• Появление резей во время мочеиспускания
• В случаях, когда в моче выявляют присутствие крови и слизи.
• При наличии сведений о врожденных и приобретенных патологиях почек.
• При частых мочеиспусканиях, сопровождающихся слишком большим или малым объемом мочи.
• При обострении хронических форм заболеваний почек.

Обычно исследование назначается врачом в ходе диагностики заболевания.